如何選擇最適合的SLE沖提溶劑

使用ISOLUTE SLE+進行液相萃取(Liquid Extraction)時,應根據分析物的logP值選擇適當的沖提溶劑。對於疏水性化合物,非極性溶劑(如己烷或庚烷)有助於得到乾淨的萃取物。極性較高的溶劑可提高極性分析物的回收率,但可能會增加基質效應。選擇合適的溶劑組合能有效平衡回收率與潔淨度。

翻譯自 How to choose the best elution solvent for SLE?2023, Stephanie J. Marin, Ph.D., Biotage

在分析化學與樣品前處理的實驗過程中,挑選合適的沖提溶劑是一項極為關鍵的步驟,對於最終實驗結果的可靠性與再現性具有決定性的影響。特別是在進行支撐式液相萃取(Supported Liquid Extraction, SLE)時,沖提溶劑的選擇直接關係到萃取物的純淨度與分析物的回收率。若使用不適當的溶劑,不僅可能導致目標化合物回收率低下,還可能因夾帶過多基質干擾物質而降低整體分析的靈敏度與準確性。因此,依據分析物的理化特性,包括其疏水性、極性、酸鹼性以及logP值(辛醇–水分配係數),來選擇與其相容性高的沖提溶劑,能顯著提升整體分析流程的效率與品質。藉由這樣的溶劑優化策略,不僅可提升方法的偵測靈敏度,還能有效降低樣品基質對分析儀器造成的潛在干擾,進而提高定量結果的可靠性與再現性。在實務應用中,這樣的選擇也有助於延長儀器壽命、降低維護成本,並提升整體實驗流程的可控性與穩定性。

支撐式液相萃取概述

支撐式液相萃取是一種現代化且更高效的液–液萃取(Liquid-liquid Extraction, LLE)替代技術。使用像 ISOLUTE SLE+ 這類商品化的SLE材料,可以在不需要激烈震盪或離心的情況下實現高效率的分離與萃取。這種技術尤其適用於生物樣品(如血清、尿液、血漿等)的處理。

SLE的基本原理與LLE相似,即將分析物從液相(通常是水相)轉移到另一個非混溶的有機相中。不同之處在於,SLE使用的是固相材料(如矽膠),其孔洞內部預先潤濕一層水,相當於“支撐”了水相,讓有機相能夠更溫和地通過,減少乳化與不穩定問題。

分析物的理化性質決定萃取條件

選擇合適的沖提溶劑時,首先應該考慮分析物的logP值(辛醇–水分配係數)。logP反映了化合物的疏水性,是影響其在SLE過程中分配行為的重要參數。

  • logP ≥ 1 的化合物通常是疏水性的,非常適合使用SLE技術,且適合使用疏水性有機溶劑如己烷(hexane)或庚烷(heptane)來沖提。
  • logP < 1 或為負值 的化合物通常較親水,這類分析物需要使用更極性的有機溶劑(如乙酸乙酯 ethyl acetate,或極性修飾劑如異丙醇IPA、甲醇MeOH)來提升回收率。

此外,也應該注意分析物的pKa值,尤其是離子化程度高的化合物,其在不同pH條件下的存在型態(中性或帶電)也會顯著影響其在萃取過程中的分配行為。

常見SLE沖提溶劑的極性與溶解度比較

以下是一些常用有機溶劑的極性與水溶性概述,按極性由低至高排列:

注意:即使某些有機溶劑與水不互溶(immiscible),它們仍可能具有一定程度的水溶性。這會影響到萃取液的純淨度與回收率。

沖提溶劑的選擇與組合建議

根據實際萃取需求,選擇沖提溶劑時可以考慮以下幾個方向:

  1. 最乾淨的萃取液:如果你的分析物在100%己烷和庚烷中可被完全萃取,那麼這是最理想的選擇,萃取液最乾淨,干擾最少。
  2. 中等極性的溶劑:如甲基三級丁基醚( Methyl-tert-butyl ether, MTBE )與二氯甲烷( Dichloromethane, DCM )這類中等極性且與水不互溶的有機溶劑,能夠提供良好的萃取能力,適用範圍更廣。
  3. 溶劑修飾劑:可在主要沖提溶劑中添加5–10%的異丙醇( Propan-2-ol, Isopropanol, IPA ),或1–2%的甲醇( Methanol, MeOH )或乙腈( Acetonitrile, ACN ),用以提升對低logP或極性分析物的回收率。但需留意添加過多會提高基質干擾。
  4. 極性萃取組合:對於極性較高的分析物,可以使用90:10的乙酸乙酯( Ethyl acetate, EtOAc, EA ):異丙醇( Propan-2-ol, Isopropanol, IPA )混合溶劑,這種配方適合SLE+方法,尤其適合分析尿液中的藥物。但需注意:雖然回收率提高了,但也增加了某些化合物的基質效應。

SLE方法開發策略與實務建議

作為方法開發人員,以下是您在SLE實驗設計中應採取的幾個步驟:

  1. 了解分析物的logP與pKa:這是選擇溶劑的基礎資訊。建議使用軟體工具(如ACD/Labs、ChemAxon)估算這些參數。
  2. 從最非極性的溶劑開始:若可行,先測試己烷或庚烷,這樣可確保最低的背景干擾。
  3. 逐步增加極性:若初步回收率不佳,可加入少量乙酸乙酯、異丙醇、或MeOH等提升極性。
  4. 使用混合溶劑組合:測試例如80:20、90:10的乙酸乙酯:異丙醇、或二氯甲烷:異丙醇組合,找出最佳平衡點。
  5. 進行方法驗證
    • 回收率(recovery:測定分析物在經過SLE處理後的定量能力。
    • 基質效應(matrix effect:觀察共萃物是否干擾訊號。
    • 方法效率(process efficiency:結合上述兩項參數,綜合評估整體方法的效能。

結語

支撐式液相萃取(SLE)是一種簡便且高效的樣品前處理技術,適用於許多臨床與藥物分析場合。選擇正確的沖提溶劑不僅能提升方法靈敏度,也能大幅降低基質干擾。透過理解分析物的理化性質、測試多組合溶劑、並評估各項性能指標,可以建立出一套具備高回收率與低背景干擾的SLE分析方法。

如果您需要針對特定分析物進行SLE溶劑選擇的建議,歡迎提供分析物結構或logP值,我們可以根據您的需求,協助設計最適合的溶劑組合與實驗流程。